Elisa試劑盒實驗中蛋白質(zhì)的分離純化
Elisa試劑盒實驗由于各種蛋白質(zhì)分子顆粒巨細、親水程度不同，故鹽析所需的鹽濃度也不一樣，因此調(diào)理混合蛋白質(zhì)溶液中的中性鹽濃度可使各種蛋白質(zhì)分段沉積。
影響鹽析的要素有：
溫度：除對溫度靈敏的蛋白質(zhì)在低溫（4度）操作外，通常可在室溫中進行。
蛋白質(zhì)鹽析常用的中性鹽，主要有硫酸銨、、硫酸鈉、氯化鈉、磷酸鈉等。
通常溫度低蛋白質(zhì)溶介度下降。但有的蛋白質(zhì)（如血紅蛋白、肌紅蛋白、清蛋白）在較高的溫度（25度）比0度時溶解度低，更簡單鹽析。
pH值：大多數(shù)蛋白質(zhì)在等電點時在濃鹽溶液中的溶介度zui低。
ELISA試劑盒實驗鹽析前血清要加等量生理鹽水稀釋，使蛋白質(zhì)含量在2.5-3.0%。
蛋白質(zhì)濃度：蛋白質(zhì)濃度高時，欲別離的蛋白質(zhì)常常夾雜著別的蛋白質(zhì)地一同沉積出來（共沉現(xiàn)象）。
其中使用zui多的硫酸銨，它的長處是溫度系數(shù)小而溶解度大（25度時飽滿溶液為4.1M，即767克/升；0度時飽滿溶解度為3.9M，即676克/升），在這一溶解度范圍內(nèi)，很多蛋白質(zhì)和酶都可以鹽析出來；
硫酸銨分段鹽析作用也比別的鹽好，不易導致蛋白質(zhì)變性。硫酸銨溶液的pH常在4.5-5.5之間，當用別的pH值進行鹽析時，需用硫酸或氨水調(diào)理。
Elisa試劑盒蛋白質(zhì)在用鹽析沉積別離后，需要將蛋白質(zhì)中的鹽除掉，常用的方法是透析，即把蛋白質(zhì)溶液裝入秀析袋內(nèi)（常用的是玻璃紙），用緩沖液進行透析，并不斷的替換緩沖液，因透析所需時刻較長，所以在低溫中進行。
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