實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究，作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹：
產品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
小鼠誘導性多潛能干細胞；PUMC-mips-A2 | 貼壁生長 | EY-X64053 |
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細胞名稱 小鼠誘導性多潛能干細胞；PUMC-mips-A2
形態特性: 樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 裸鼠移植實驗證明可向三個胚層分化。
培養條件: KO-DMEM+15%FBS+103U/mlLIF+2mML-Glu+1%NEAA+0.1Mβ-Mer
傳代方法: 1:10傳代；3~4天傳代一次
傳代情況:
凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 培養法（-）
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化；或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來，吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養液，吹打下細胞，即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落， 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細胞，盡量去除細胞消化液后，加入含血清的*培養液重新懸浮細胞，即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
可溶性轉鐵蛋白受體檢測試劑盒生長特性: 半貼壁生長培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSsoluble transferrin receptor
類脂褐素檢測試劑盒生長特性: 半貼壁生長培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSLipofuscin-like pigments
淋巴細胞趨化因子檢測試劑盒生長特性: 半貼壁生長培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSLymphotactin
磷核糖焦磷?；D移酶檢測試劑盒生長特性: 半貼壁生長培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSPRPP aidotransferase
磷化IKB alpha檢測試劑盒生長特性: 半貼壁生長培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSphospho-NFKBIA
磷化N-甲基-D-天冬氨檢測試劑盒生長特性: 半貼壁生長培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSp-NMDA
磷化p38絲裂原活化蛋白激酶檢測試劑盒生長特性: 半貼壁生長培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSphospho-p38 mitogen activited protein kinase
磷激酶1檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS；IL-3orrhGM-CSFphosphoglycerate kinase 1
磷脂酰乙醇胺-N-甲基轉移酶檢測試劑盒生長特性: 半貼壁生長培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSphosphatidylethanolamine N-methyltransferase
硫脫氫表雄檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBSDehydroepiandrosterone sulfate
卵巢癌標志物檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSovarian cancer marker-CA125
卵清蛋白特異性IgE檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBSovalbumin specific IgE
卵清蛋白特異性IgG1檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBSovalbumin specific IgG1
母親DDP同源物3檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS；0.023IU/mlinsulinMothers against decapentaplegic homolog 3
鈉離子通道蛋白Nav1.7檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBSNav1.7
鈉通道S1A基因檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長，聚團，少數貼壁培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBSsodium channel α1 subunit gene
內皮型NO合酶3檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長，松散貼壁培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSEndothelial nitric oxide synthase 3
小鼠誘導性多潛能干細胞；PUMC-mips-A2莪術醇4871-97-0中文別名：姜黃醇
英文名：Curcumol
CAS登錄號：4871-97-0
分子式：C15H24O2
分子量：236.35
分子結構：
外觀：無色針狀結晶（）
規格：20mg/支
純度：≥ 98%
用途：用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。
提取來源：Curcuma zedoaria(Berg.)Rose
熔點：103-104℃
藥理藥效：具有抗腫瘤作用。臨床對療效較好。
貯存條件： 4℃冷藏、密封、避光
有效期： 2年
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