實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究，作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹：
產品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
大鼠骨骼肌成肌細胞；L6 | 貼壁生長 | EY-X63349 |
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細胞名稱 大鼠骨骼肌成肌細胞；L6
形態特性: 成肌細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞是Yaffe在甲基膽蒽存在的情況下從大鼠大腿肌原代培養的最初兩代細胞中分離得到的；在培養基中融合形成多核的肌管和橫紋肌纖維，細胞融合的程度隨著代數的增加而下降，因此細胞應低代次冷凍并周期性地重新以選擇融合能力強的細胞。鼠痘病毒陰性。該細胞應在達匯合狀態前傳代，以延緩細胞分化能力的喪失。
培養條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS；4mML-glutamine
傳代方法: 1:20~1:40傳代；每周換液2~3次。
傳代情況: C3
凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 培養法（-）
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化；或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來，吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養液，吹打下細胞，即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落， 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細胞，盡量去除細胞消化液后，加入含血清的*培養液重新懸浮細胞，即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
小鼠雜交瘤細胞株；FQ-4F12形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-VPS35 Polyclonal Antibody
鵝胚上皮細胞系；WWX-GEEC03形態特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Anti-MANF Polyclonal Antibody
小鼠雜交瘤細胞株；P-7E11-IgG形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-MYBBP1A Polyclonal Antibody
小鼠雜交瘤細胞株；P-7E11-IgA形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-MMP8 Polyclonal Antibody
小鼠雜交瘤細胞株；3D-3A12-IgG形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-TIMP3 Polyclonal Antibody
小鼠雜交瘤細胞株；3D-3A12-IgA形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-PIP4K2A Polyclonal Antibody
小鼠雜交瘤細胞株；ES形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-PGRMC1 Polyclonal Antibody
小鼠雜交瘤細胞株；3D4形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-E2F6 Polyclonal Antibody
小鼠雜交瘤細胞株；2B8形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-TFF1 Polyclonal Antibody
小鼠雜交瘤細胞株；3D-2A10-IgG形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-TP53AIP1 Polyclonal Antibody
小鼠雜交瘤細胞株；3D-2A10-IgA形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-VEGFC Polyclonal Antibody
小鼠雜交瘤細胞株；HBNV2形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-KA2 Polyclonal Antibody
小鼠雜交瘤細胞株；HBsAg-5H2形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-TXN Polyclonal Antibody
小鼠雜交瘤細胞株；3D5形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-THBD Polyclonal Antibody
小鼠雜交瘤細胞株；VP13-6G10形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-PLIN1 Polyclonal Antibody
小鼠雜交瘤細胞株；VP13-3C11形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-DSC1 Polyclonal Antibody
大鼠骨骼肌成肌細胞；L6大鼠白介素5(IL-5)ELISA試劑盒GAELISAKit產品規格:48T/96T。
大鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒GAELISAKit產品規格:48T/96T。
大鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA試劑盒Gal-6SELISAKit產品規格:48T/96T。
大鼠白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒Gal-6SELISAKit產品規格:48T/96T。
大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA試劑盒GalELISAKit產品規格:48T/96T。
大鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒GALELISAKit產品規格:48T/96T。
大鼠白介素17(IL-17)ELISA試劑盒GalELISAKit產品規格:48T/96T。
大鼠白介素16(IL-16)ELISA試劑盒GALELISAKit產品規格:48T/96T。
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