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產品展示   ProductsATCC細胞>>轉化細胞>>胚胎干細胞;HES3.3
 
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產品名稱:
胚胎干細胞;HES3.3
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產品特點:
胚胎干細胞;HES3.3相關產品:
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還原型70-18-8
3-氨基丁酸541-48-0
D-高苯82795-51-5
BOC-L-13734-41-3
  胚胎干細胞;HES3.3的詳細資料:

公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:

產品名稱

生長特性

貨號

胚胎干細胞;HES3.3

貼壁生長

EY-X63705

細胞名稱  胚胎干細胞;HES3.3
形態特性: 上皮細胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。

培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次

傳代情況: C5

凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 陰性
?
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Ajmalicine

CAS No.:483-04-5

中文名:阿嗎

分子式:C21H24N2O3

廣天仙子 訂購|咨詢  煙受體1(NIACR1) 規格: 1g

N異基去酯 訂購|咨詢  煙酰腺嘌呤二核苷(NAADP) 規格: 50mg

紫荊皮 訂購|咨詢  型膽受體α1(CHRNα1) 規格: 0.5g

檀香 訂購|咨詢  型膽受體α1(CHRNα1) 規格: 1g

土荊皮(金錢松) 訂購|咨詢  型膽受體α2(CHRNα2) 規格: 1g

訂購|咨詢  型膽受體α3(CHRNα3) 規格: 100mg

板栗殼 訂購|咨詢  型膽受體α4(CHRNα4) 規格: 0.5g

賴諾普利 訂購|咨詢  型膽受體α5(CHRNα5) 規格: 100mg

卡地平 訂購|咨詢  型膽受體α7(CHRNα7) 規格: 100mg

訂購|咨詢  型膽受體β1(CHRNβ1) 規格: 100mg

小豆蔻明 訂購|咨詢  型膽受體β2(CHRNβ2) 規格: 20mg

鄰磺酰 訂購|咨詢  型膽受體β3(CHRNβ3) 規格: 100mg

訂購|咨詢  海馬鈣蛋白(HPCA) 規格: 50mg

槐米 訂購|咨詢  海藻糖酶(TREH) 規格: 2g

訂購|咨詢  海藻糖酶(TREH) 規格: 100mg

桂枝 訂購|咨詢  家族性地中海熱基因(MEFV) 規格: 0.5g

酰人生長激素 訂購|咨詢  調節激活正常T細胞表達分泌因子(RANTES) 規格: 2mg

莫司汀 訂購|咨詢  調節激活正常T細胞表達分泌因子(RANTES) 規格: 100mg

Plastin L  淋巴細胞胞漿蛋白LCP1抗體    現貨供應 0.2ml Maraviroc

RASD2/Tumor endothelial marker 2  腫瘤血管內皮標記蛋白2抗體    現貨供應 0.2ml RevalorH Trenbolone acetate

RNF43  環指蛋白43抗體    現貨供應 0.2ml Silibinin

RPLP2  性核糖體蛋白P2抗體    現貨供應 0.2ml Silibinin

SART3  T淋巴細胞識別的鱗狀細胞癌SART3抗體    現貨供應 0.2ml Ezetimibe

SDCCAG10  結腸癌抗原10抗體    現貨供應 0.2ml Ezetimibe

SDCCAG8  結腸癌抗原8抗體    現貨供應 0.2ml Mepivacaine HCl

SPANX  腫瘤/抗原11.3抗體    現貨供應 0.1ml Amprenavir

維生素H  進口、國產  英文名稱:DBiotin  含量:IND

維生素12  進口、國產  英文名稱:VB12  含量:AR,75%

胃液素  進口、國產  英文名稱:Pepsin(porcinestomachmucose)  含量:生物技術級,300u/mg

蝸牛酶  進口、國產  英文名稱:Snailase  含量:BR,300u/mg,懸浮液

蝸牛凝集素  進口、國產  英文名稱:Snailagglutinin  含量:BR,Ⅰ型,>125CDU/mg

沃來西脫藍B  進口、國產  英文名稱:OracetblueB  含量:BS

烏美司  進口、國產  英文名稱:Bestatin  含量:USP級,95%,900mcg/mg

鎢硅  進口、國產  英文名稱:Silicotungsticacidhydrate  含量:AR,86.5%

 進口、國產  英文名稱:Tungsten  含量:AR,99.7%

鎢鉀  進口、國產  英文名稱:Potassiumtungstate  含量:AR,95%
胚胎干細胞;HES3.3營養瓊脂斜面規格:250g用途:用于細菌的純化培養

WS 瓊脂規格:250g用途:用于沙門氏菌的選擇性分離(GB標準)

曙紅瓊脂培養基規格:BR250g詳情介紹

knudson C 培養基規格:用途:用于蘭花組織培養

松三糖規格:1g用途:微生物指示劑

平板計數瓊脂(PCA)規格:250g用途:標準平板計數瓊脂,含糖,用于細菌總數的測定(GB、SN標準)
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

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